عشرة أخطاء شائعة في استخدام الأطوار السائلة المتحركة!

الطور المتحرك يعادل الطور السائل من الدم، وهناك أشياء مختلفة يجب الانتباه إليها أثناء الاستخدام. ومن بينها بعض "المزالق" التي يجب الانتباه إليها.

01. قياس الرقم الهيدروجيني للطور المتحرك بعد إضافة المذيب العضوي

إذا قمت بقياس الرقم الهيدروجيني باستخدام مادة مضافة عضوية، فسيكون الرقم الهيدروجيني الذي تحصل عليه مختلفًا عما كان عليه قبل إضافة المذيب العضوي. ومع ذلك، فإن الشيء الأكثر أهمية هو أن تكون متسقة. إذا كنت تقوم دائمًا بقياس الرقم الهيدروجيني بعد إضافة المذيب العضوي، فتأكد من ذكر خطواتك بالطريقة التي تستخدمها حتى يتبع الآخرون نفس الطريقة. هذه الطريقة ليست دقيقة بنسبة 100%، لكنها على الأقل ستحافظ على اتساق الطريقة. قد يكون هذا أكثر أهمية من الحصول على قيمة دقيقة للأس الهيدروجيني.

02. لا يوجد مخزن مؤقت مستخدم

الغرض من المخزن المؤقت هو التحكم في الرقم الهيدروجيني ومنعه من التغيير. تعمل العديد من الطرق الأخرى على تغيير الرقم الهيدروجيني للطور المتحرك، مما قد يسبب تغيرات في وقت الاحتفاظ وشكل الذروة واستجابة الذروة.

حمض الفورميك، TFA، وما إلى ذلك ليست مخازن مؤقتة

03. عدم استخدام العازلة ضمن نطاق الرقم الهيدروجيني الطبيعي

يحتوي كل مخزن مؤقت على نطاق عرض لوحدة الأس الهيدروجيني يبلغ 2، والذي يوفر من خلاله أفضل استقرار للأس الهيدروجيني. لن توفر المخازن المؤقتة الموجودة خارج هذه النافذة مقاومة فعالة لتغيرات الأس الهيدروجيني. إما أن تستخدم محلولًا مؤقتًا في النطاق الصحيح، أو تختار محلولًا يغطي نطاق الرقم الهيدروجيني الذي تحتاجه.

04. أضف محلولًا عازلًا إلى المحلول العضوي

من المرجح أن يؤدي خلط المحلول المنظم مع الطور العضوي إلى ترسيب المخزن المؤقت. وفي كثير من الحالات، حتى لو حدث هطول للأمطار، فلا يزال من الصعب اكتشافه. تذكر دائمًا إضافة المحلول العضوي إلى الطور المائي، مما قد يقلل بشكل كبير من فرصة هطول الأمطار العازلة.

05. امزج تدرج التركيز من 0% بمضخة

يمكن للمضخات المتوفرة اليوم أن تمزج بشكل فعال المراحل المتنقلة ومخرجات الغاز المضمنة، ولكن ليس كل من يستخدم طريقتك سيكون لديه مضخة عالية الجودة. امزج A وB في حل واحد وقم بتشغيله بنسبة 100% في السطر.

على سبيل المثال، يمكن تحضير 950 مل من خليط البداية العضوي عن طريق خلطه مع 50 مل من الماء. وتتمثل ميزة ذلك في أنه يمكن أن يقلل من التباين بين HPLCs ويقلل من احتمالية ظهور الفقاعات وهطول الأمطار في النظام. ومن الجدير بالذكر أن نسبة خليط المضخة هي 95:5، وهذا لا يعني أن وقت الاحتفاظ المختلط مسبقًا في الزجاجة هو أيضًا 95:5.

06. عدم استخدام الحمض (القاعدة) المعدل الصحيح لتغيير المادة العازلة

استخدم فقط الحمض أو القاعدة التي تشكل الملح المنظم الذي تستخدمه. على سبيل المثال، يجب تحضير محلول فوسفات الصوديوم باستخدام حمض الفوسفوريك أو هيدروكسيد الصوديوم فقط.

07. عدم ذكر كافة المعلومات الخاصة بالمخزن المؤقت في الطريقة، مثل إضافة 5 جرام منفوسفات الصوديوم إلى 1000 مل من الماء.

يحدد نوع المخزن المؤقت نطاق الرقم الهيدروجيني الذي يمكن تخزينه مؤقتًا. التركيز المطلوب يحدد قوة المخزن المؤقت. 5 جرام أو فوسفات الصوديوم اللامائي و 5 جرام من مونوهيدرات فوسفات الصوديوم لها قوة عازلة مختلفة.

08. إضافة المذيبات العضوية قبل الفحص

إذا استخدمت الطريقة السابقة محلولًا منظمًا لخط الأساس B، وكانت طريقتك تستخدم محلولًا عضويًا لخط الأساس B، نأمل أن تتمكن من تسوية المخزن المؤقت في أنابيب المضخة ورأس المضخة.

09. ارفع الزجاجة وأفرغ القطرة الأخيرة

هناك احتمال كبير ألا يكون لديك ما يكفي من الطور المتحرك لإكمال الجولة بأكملها وسوف تدخن عينتك. بالإضافة إلى إمكانية احتراق نظام المضخة والعمود، فإن الطور المتحرك سوف يتبخر تماما وسيتغير الطور المتحرك الموجود في أعلى الزجاجة.

10. استخدم الطور المتحرك لتفريغ الغاز بالموجات فوق الصوتية

النقطة الأكثر أهمية هي التأكد من إذابة جميع الأملاح العازلة، ولكن هذه هي أسوأ طريقة لإزالة الغاز وستؤدي إلى تسخين الطور المتحرك بسرعة، مما يتسبب في تبخر المكونات العضوية. لتوفير المتاعب غير الضرورية لاحقًا، خذ خمس دقائق لتصفية مرحلة هاتفك المحمول بالتفريغ.